Um analista do laboratório de controle de qualidade da UNCISAL realizou a determinação de um fármaco ácido fraco (pKa = 4,5) em uma formulação farmacêutica utilizando espectrofotometria de absorção no UV-Visível. Para tanto, preparou duas soluções do fármaco com a mesma concentração analítica: a solução A em tampão fosfato pH 2,0 e a solução B em tampão fosfato pH 7,0. As leituras de absorbância foram realizadas em 270 nm, comprimento de onda em que apenas a espécie desprotonada (forma ionizada) do fármaco apresenta absorção significativa, enquanto a forma protonada não absorve nesse comprimento de onda. Nessas condições, espera-se que a absorbância medida na solução B seja significativamente maior que a absorbância medida na solução A, uma vez que, em pH 7,0, a razão entre a concentração da forma desprotonada e a concentração da forma protonada do fármaco é de aproximadamente 316:1, enquanto em pH 2,0 essa razão é de aproximadamente 1:316.
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